快看看你是不是用這個方法操作DNA提取試劑盒的

點擊次數：2034 更新時間：2022-04-18

　　DNA提取試劑盒是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。

　　樣本處理及要求：

　　1、組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20 分鐘左右。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

　　2、標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。

　　3、不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

　　DNA提取試劑盒的操作步驟：

　　1、標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL

　　2、加樣：分別設空白孔、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

　　3、加酶：每孔加入酶標試劑100μl，空白孔除外。

　　4、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。

　　5、配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。

　　6、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

　　7、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

　　8、終止：每孔加終止液50μl，終止反應。

　　9、測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。